从重组、突变、迁移与基因流动以及选择等方面探讨了林木病原真菌群体遗传多样性的主要动因,从表型观察、致病力和抗药力等特性的人工选择、营养体亲和性测定以及同工酶分析和DNA分析(RFLP、RAPD、AFLP、RAMS)等现代分子标记技术几方面讨论了研究林木病原真菌群体分化的主要方法与技术,并着重论述了RAPD技术在林木病原真菌群体分化研究(如病原真菌的系统分类、亲缘关系与进化、致病性检测与流行性分析)中的应用.

为提高微生物油脂产量,以产油微生物深黄被孢霉为试验菌株,采用单因素试验设计,通过摇瓶培养,研究了产脂培养基中碳源、氮源种类及其浓度、接种量、初始pH值、无机盐离子对菌体生长和油脂积累的影响,确定了深黄被孢霉摇瓶发酵产油脂的优化培养条件为:葡萄糖100 g·L-1,酵母粉3.0 g·L-1,接种量为20%,pH值为5.0 - 6.0,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5 g·L-1,磷酸二氢钾(KH2PO4)2.0 g·L-1。在优化培养条件下菌体生物量为20.62 g·L-1,油脂含量为43.02%,油脂产量为8.87 g·L-1。

[目的]为了构建松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)果胶酶Bxpel2基因干扰载体.[方法]通过Trizol 法提取松材线虫总RNA,反转录合成cDNA,设计带T7启动子的果胶酶Bxpel2基因引物,以cDNA为模板扩增出果胶酶Bxpel2基因片段,连接到RNA干扰载体,再以干扰载体为模板,PCR扩增出目的片段后进行测序鉴定,合成果胶酶Bxpel2基因双链RNA(dsRNA),采用RT-PCR检测松材线虫Bxpel2基因干扰后的表达情况.[结果]表明:1)提取的松材线虫总RNA完整性好,无降解;2)成功克隆出松材线虫果胶酶Bxpel2基因片段(790 bp)并将其连接至pMD19-T载体;3)以RNA干扰载体为模板合成dsRNA,浓度分别为1.313 mg·mL-1和1.152 mg·mL-1;4)RT-PCR结果显示,松材线虫经过dsRNA干扰后,Bxpel2基因表达基本受到抑制.[结论]成功构建松材线虫果胶酶Bxpel2基因干扰载体,为进一步研究Bxpel2基因在松材线虫致病过程中的作用和功能奠定了良好的基础.